酶聯免疫吸附實驗(Elabscience)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。該技術可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優點。
但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在臨床檢驗中除正常反應外,有時??梢姷揭恍╁e誤結果(即假陽性或假陰性)如標本的影響;信至利達為大家分析
Elabscience生化試劑盒檢測可能失敗的因素。?
標本受細菌污染??諝庵谢蛘邔嶒灢僮鳝h境中有一些污染性細菌,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產生非特異性顯色而干擾測定結果。
標本保存不當。在冰箱中保存過久的標本,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、造成假陽性;為克服上述干擾,Elabscience生化試劑盒測定的標本宜為新鮮采集;如不能立即測定。
例如:5d內測定的血清標本可存放于4℃,1周后測定的血清標本應低溫凍存;凍存后融解的標本,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混合后再測定,但混勻時應輕柔,不可強烈振蕩。
塑料試管能吸附抗原物質,血液樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。使用真空采管;并使用非抗凝標本,肝素抗凝血漿會增加OD值,EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統中辣根過氧化物酶活性。
標本凝固不全。在工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液或其他樣本還未開始凝固時即強行離心分離,使樣品中仍殘留部分干擾蛋白原,在Elabscience生化試劑盒測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果。
此外,溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產生假陽性??赡苁侨苎逯泻羞^氧化酶物質(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗滌程中往往難以完全洗脫,它可使H2O2釋放出原生態氧(O),從而催化底物四甲基聯苯胺生成可溶性的有色物質,即顯藍色,產生假陽性。?