細胞轉染后想評估轉染效率，不用非要構建熒光表達質粒這么麻煩，我們還可以通過核酸標記來實現。
FITC標記試劑盒是市場首項“一步法”核酸標記技術，采用的是一種非酶化學方法，可以將熒光或非熒光標記物通過一步法化學反應直接標記在DNA或RNA上，且不影響核酸的雜交、表達等下游實驗，非常的方便快捷。同時，標記的熒光或非熒光標記物可以便于轉染效率監測，體內、體外示蹤，分子雜交等應用。
那么什么是一步法核酸標記呢？它的秘密就在標記物的設計上。
FITC系列標記物由三部分結構組成，分別是：熒光基團或半抗原（綠色部分），Linker（黃色部分，促進與核酸的靜電相互作用）和活性烷基化基團（藍色部分，將FITC試劑共價連接到核酸內的任何活性雜原子上）。
當標記物與待標記核酸混合后，在37℃條件下孵育1小時，FITC標記物就能通過共價結合方式，不可逆地標記在DNA或RNA鏈上，反應流程如下所示。由于FITC標記方法不會破壞核酸序列及其結構完整性，使得該技術可以廣泛應用于體內和體外分子生物學實驗。
如何選擇FITC標記試劑盒？
FITC標記試劑（µl）：核酸（µg）比率（v：w）是每個試劑盒各自方案中規定的推薦起始值。在標準FITC標記反應（37°C，1小時孵育）中使用此起始比率，可以預期達到表中列出的標記密度。重要的是，我們還可以通過調整比例和/或反應時間輕松調整標記密度。
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