流式抗體有哪些特性？如何使用保存

　　熒光抗體的選擇是多色流式設計的關鍵步驟。流式抗體選擇的優劣，取決于所選的標記物和偶聯的熒光染料以及它們與流式細胞儀光學配置的兼容性。

 

　　抗體的特性：

 

　　1、靶標特異性：確定標記物名稱，確定是細胞表面表達，還是細胞內表達。細胞內表達需要進行透膜。

 

　　2、物種來源：確定待測樣本的種屬來源。例如，抗小鼠的抗體，不能用于人的樣本的檢測。

 

　　3、實驗類型：大多數只標明用于WB、IP、IHC、IF、ChIP的抗體都不適用于流式實驗。選擇標明用于FC實驗的抗體，并有有引用文獻和實驗數據圖。

 

　　4、克隆號：有一些標記物有多個克隆號，選擇文獻報道中使用多，熒光標記種類多的克隆號。

 

　　5、廠家和批號：不同廠家或同一廠家生產的不同批號的相同熒光的相同標記物的抗體，熒光染料的強度可能有少許差別，不建議一次實驗混合使用。

 

　　流式抗體的使用與保存：

 

　　1、抗體稀釋

 

　　適當的抗體使用濃度，才能真實的反應各種細胞的比例?？贵w不足，可能出現假陰性結果；抗體過量，可能出現假陽性結果?？梢酝ㄟ^檢測抗體滴度，獲得使用稀釋度。通常使用稀釋度會低于供應商建議的稀釋度，這樣不僅可以獲得可靠的染色結果，還能將花費降小。

 

　　2、抗體保存

 

　　直標的流式抗體一般需要4℃避光保存，不要凍存。冷凍可能會導致熒光抗體沉淀和聚集，影響抗體的效價。