良好的制片是所有病理實驗的基礎,這對于骨組織而言更為重要。骨組織制片,脫鈣是非常關鍵的組織處理步驟,能不能制出好的含骨切片以及后期染色如何,主要取決于
ElabscienceEDTA脫鈣液的選擇和脫鈣的質量。
一般來說,只要組織中含有骨、軟骨等都需要脫鈣后才能制片。例如,研究吸入性藥物時,鼻腔是需要重點關注的組織結構;研究骨折愈合、骨組織腫瘤時,脫鈣必不可少;研究血液腫瘤時常需觀察動物胸骨骨髓紅系、粒系和巨核系,脫鈣還是少不了。
ElabscienceEDTA脫鈣液配制30%鹽酸溶液1000ml(10%中性福爾馬林液700ml+濃鹽酸300ml)加入140g氯化鈉,待其完全溶解后再加入20ml冰醋酸。在日常病理技術工作中,有多種對骨骼的脫鈣方法和脫鈣組織切片的制作方法。
本文所述脫鈣方法和脫鈣液從脫鈣速度,對組織的損傷程度以及切片染色等方面效果都比較理想,ElabscienceEDTA脫鈣液與其他酸類脫鈣液相比較,對組織損傷小,脫鈣時間短,并作用溫和,其中30%的鹽酸溶液對脫鈣組織造成的損害較小,對組織不膨脹,不至于導致脫鈣過程緩慢,但核染色不佳。
加入氯化鈉可以防止脫鈣組織因經過鹽酸脫鈣后導致的切片染色偏紅,加入冰醋酸可使脫鈣組織軟化,有利于切片,從而使制片效果更加理想。對照組以單純30%鹽酸為主的ElabscienceEDTA脫鈣液與新方法脫鈣液對同等體積、大小、部位相同的骨組織同時進行脫鈣,前者制作的骨骼切片不平整,染色偏紅,胞核紅染,核質不清晰,切片整體組織結構顯示不清。
經新方法脫鈣后所制作的切片組織結構顯示清晰,切片中的軟組織和骨組織結構均可完整顯示,細胞染色清晰,核質對比鮮明,制片中所用的固定劑、脫水劑、透明劑等都為日常技術工作試劑,而且制作出的切片效果很好。
在本方法中所用的固定、脫水、透明、浸蠟、染色試劑都可以數次重復使用,試劑配制和操作方法簡單,值得臨床推廣應用。