品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一周 |
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應用領域 | 醫療衛生,食品,生物產業,農業,制藥 |
Annexin V染色液-FITC
Annexin V染色液-FITC
Annexin V 是一種鈣離子依賴性磷脂結合蛋白,與磷脂酰絲氨酸 PS 有高度親和力,可通過細胞外側暴露的 PS 與凋亡早期細胞胞膜結合,將 Annexin V 標記熒光染料 FITC 利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡。Annexin V 搭配 PI 或 7-AAD、DAPI 等 DNA 染色液使用,可區分處于不同凋亡時期的細胞。
實驗操作指南步驟
1. 細胞按照實驗方案進行凋亡誘導,300 g 離心 5 min,棄上清,收集細胞,PBS 洗滌一次,輕輕重懸細胞并計數。注:本品僅在懸浮培養的細胞中驗證,良好的細胞狀態是實驗的關鍵。貼壁生長的細胞用于凋亡檢測時,可能會因為胰酶消化等處理導致細胞的壞死或凋亡,對實驗結果可能存在不可控的影響,請謹慎處理。
2. 取 1~5 × 105重懸的細胞,300 g 離心 5 min,棄上清。用 PBS 洗滌細胞一次,離心后棄上清,加入500 μL 稀釋的 1 × Annexin V Binding Buffer 工作液重懸細胞。
3. 細胞懸液中加入 5 μL 的 Annexin V-FITC 染色液和 5 μL 的細胞核 DNA 染色液。
4. 輕柔渦旋混勻后,室溫避光孵育 15~20 min。
5. 反應完成后立即上機檢測。如不能及時檢測,請于冰上避光靜置并于 1 小時內完成檢測。
保存條件
2~8°C 可保存 1 年。Annexin V-FITC 染色液需要避光保存。
注意事項
保質期 1 年,為獲得最佳的使用效果,請在 3~6 個月內使用,Annexin V-FITC 禁止冷凍保存。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加。
熒光物質均易發生淬滅,進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間,操作和存放過程盡量注意避光保存。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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